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PCR扩增试剂盒可检测低至10ng的人基因组DNA

浏览次数:14发布日期:2025-12-26
  PCR扩增试剂盒凭借其高效、准确、便捷的特点,已成为生命科学研究和临床诊断中不可少的工具。
 
  PCR扩增试剂盒的优点:
 
  1.高灵敏度:可检测低至10ng的人基因组DNA,甚至达到10cfu/ml的细菌浓度,适用于早期诊断。
 
  2.高特异性:通过特异性引物设计,结合热稳定DNA聚合酶的准确延伸能力,能够准确识别目标序列,减少非特异性扩增。特殊处理的探针技术进一步强化了识别能力,确保检测结果的可靠性,避免假阳性干扰。
 
  3.操作简便:预混试剂和即用型设计简化了实验流程,减少人工配制环节。一体化的试剂体系降低了操作难度,使非专业人员也能获得一致的实验结果。
 
  4.快速高效:整个检测流程只需3小时,可在2-3小时内完成96个样品的定量分析,提升检测效率。
 
  5.稳定性强:通过冻干工艺和特殊稳定剂的应用,PCR检测试剂盒实现了常温储存和长时间保存。优化后的冻干粉剂型不仅方便运输,还能在恢复溶液后保持原有性能,降低因储存条件导致的性能衰减风险。
 
  6.自动化与安全性:部分试剂盒采用闭管检测设计,无需后期处理,防止污染;荧光定量PCR技术更可实现实时监测,减少放射性物质的使用。
 
  PCR扩增试剂盒的测定步骤:
 
  1.准备工作
 
  -确保所有需要使用的仪器设备都已准备就绪,包括热循环仪、微量移液器以及离心机等。同时,仔细阅读试剂盒提供的说明书,了解每个成分的具体用途和推荐的工作浓度。
 
  2.样本处理
 
  -根据实验目的选择合适的样本类型(如血液、组织切片或环境样本),并按照说明书指导进行预处理。
 
  3.配制反应体系
 
  -根据试剂盒说明书的要求,配制PCR反应体系,包括引物、荧光探针、dNTPs、DNA聚合酶等成分。这些成分需要按照特定的比例和顺序加入到反应管中。
 
  4.加样
 
  -将提取的DNA加入到PCR反应体系中。
 
  5.进行PCR反应
 
  -设定好热循环仪的反应条件,包括变性、退火、延伸三个步骤,每个步骤需要特定的温度和时间。反应次数通常为25-35个循环。
 
  6.结果分析
 
  -待测样本与标准品经同步进行实时荧光定量PCR扩增后,目的基因与参照基因按照各自的标准曲线计算各自的拷贝数,计算待测样本的目的基因与参照基因拷贝数比值,即得目的基因的拷贝数相对定量检测结果。
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